Haponkestävyys - Acid-fastness

Mycobacterium tuberculosis (värjätty punaiseksi) kudoksessa (sininen).

Haponkestävyys on tiettyjen bakteeri- ja eukaryoottisolujen sekä joidenkin solun alarakenteiden fyysinen ominaisuus , erityisesti niiden vastustuskyky happojen värjäytymiselle laboratoriovärjäysmenettelyissä . Kun nämä organismit on värjätty osana näytettä, ne voivat vastustaa happo- ja/tai etanolipohjaisia ​​värinpoistomenettelyjä, jotka ovat yleisiä monissa värjäysprotokollissa, joten nimi happokestävä .

Haponkestävyyden mekanismit vaihtelevat lajeittain, vaikka tunnetuin esimerkki on suvusta Mycobacterium , johon kuuluvat tuberkuloosista ja lepraista vastaavat lajit. Happo-nopeuteen mykobakteerien johtuu korkean mykolihapon niiden sisällön soluseinien , joka vastaa värjäyskuvion huono imeytyminen, jota seuraa korkea retentio. Jotkut bakteerit voivat myös olla osittain happokestäviä , kuten Nocardia .

Haponkestäviä organismeja on vaikea luonnehtia tavanomaisilla mikrobiologisilla tekniikoilla, vaikka ne voidaan värjätä käyttämällä väkeviä väriaineita, etenkin kun värjäysprosessi yhdistetään lämmön kanssa. Jotkut, kuten mykobakteerit , voidaan värjätä Gram -värillä , mutta ne eivät ota kristalliviolettia hyvin ja näyttävät siten vaalean violetilta, mikä voi silti johtaa virheelliseen gramnegatiiviseen tunnistukseen.

Yleisin happokestävien bakteerien tunnistamiseen käytetty värjäystekniikka on Ziehl – ​​Neelsen-tahra , jossa happokestävät lajit värjätään kirkkaan punaisina ja erottuvat selvästi sinistä taustaa vasten. Toinen menetelmä on Kinyoun -menetelmä , jossa bakteerit värjätään kirkkaan punaisiksi ja erottuvat selvästi vihreää taustaa vasten. Happokestävät mykobakteerit voidaan visualisoida myös fluoresenssimikroskoopilla käyttämällä spesifisiä fluoresoivia väriaineita (esimerkiksi auramiini-rodamiinivärjäys ). Paragonimus westermani -loistaudin keuhkoputken munat tuhoutuvat itse asiassa tahralla , mikä voi vaikeuttaa diagnoosia potilailla, joilla on tuberkuloosin kaltaisia ​​oireita.

Jotkut happokestävät värjäystekniikat

• Ziehl – ​​Neelsen -tahra (klassiset ja muokatut valkaisutyypit)
• Kinyoun tahra
• Väri sokeita (tai taustoja jossa havaitsemiseksi punainen bakteerit on vaikeaa), Victoria sininen voidaan korvata karbol fuksiini ja pikriinihappo voidaan käyttää laskurin tahra sijasta metyleenisinistä , ja loput Kinyoun tekniikkaa voidaan käyttää.
  • Erilaisia ​​bakteeri -itiövärjäystekniikoita, joissa käytetään Kenyonia, esim
    • Moellerin menetelmä
    • Dornerin menetelmä (hapon alkoholin värinpoistoaine) ilman Schaeffer -Fultonin modifikaatiota (värinpoisto vedellä)
    • Pesuaine, jossa käytetään Tergitol 7: tä, ionittomia polyglykolieetteriä sisältäviä pinta-aktiivisia aineita, tyyppi NP-7
• Fite tahra
  • Fite-Faraco-tahra
  • Wade Fite tahra
• Ellis ja Zabrowarny -tahra (ei fenolia/karbolihappoa)
• Auramiini-rodamiinitahra
• Auramiinifenolivärjäys

Merkittäviä happokestäviä rakenteita

Hyvin harvat rakenteet ovat happokestäviä; tämä tekee happokestävyyden värjäyksestä erityisen hyödyllistä diagnoosissa. Seuraavat ovat merkittäviä esimerkkejä rakenteista, jotka ovat happokestäviä tai muunnettuja happokestäviä:

• Kaikki mykobakteerit - M. tuberculosis , M. leprae , M. smegmatis ja epätyypillinen Mycobacterium
• Actinomycetes (erityisesti jotkut aerobiset), joiden soluseinässä on mykolihappoa (huom. Streptomyces EI ole); ei pidä sekoittaa Actinomycesiin , joka on haponkestävä aktinomykeettinen suku
  • Nocardia (heikosti haponkestävä; vastustaa värinmuutosta heikommilla happopitoisuuksilla)
  • Rhodococcus
  • Gordonia (näyttelijä)
  • Tsukamurella
  • Dietzia
• Siittiöiden pää
• Bakteeri -itiöt , katso Endospore
• Legionella micdadei
• Tietyt solujen sulkeumat, esim
  • Sytoplasmiset inkluusiokappaleet nähdään
    • Neuronit aivokuoren kerroksessa 5 neuronaalinen ceroidi lipofuscinosis ( Battenin tauti ).
  • Näkyviä ydinpiirustuskappaleita
    • Lyijymyrkytys
    • Vismuttimyrkytys.
• Ookystien noin kokkidi loisia ulosteisiin, kuten:
  • Cryptosporidium parvum ,
  • Isospora belli
  • Cyclospora cayetanensis .
• Muutamia muita loisia:
  • Sarcocystis
  • Taenia saginata -munat värjäävät hyvin, mutta Taenia solium -munat eivät (voidaan erottaa)
  • Hydatidikystat , erityisesti niiden " koukut ", värjäävät epäsäännöllisesti ZN -värjäyksellä, mutta ne säteilevät kirkkaan punaista fluoresenssia vihreän valon alla ja voivat auttaa havaitsemista kohtalaisen raskailla taustoilla tai niukoilla koukkuilla.
• Sienihiiva on värjätty epäyhtenäisesti happokestävällä värjäyksellä, jota pidetään sienien kapeakirjoisena tahrana. Sienten happokestävyyttä koskevassa tutkimuksessa 60% blastomycesistä ja 47% histoplasmasta osoitti hiivan kaltaisten solujen positiivisen sytoplasmisen värjäytymisen, ja Cryptococcus tai candida eivät värjänneet, ja Coccidioides-endosporeissa havaittiin hyvin harvinaista värjäytymistä.

Viitteet

Esimerkkejä online -protokollista

• Ziehl – ​​Neelsen -protokolla ( PDF -muoto).
• Vaihtoehtoinen Ellis & Zabrowarny -menetelmä Arkistoitu 2006-01-04 Wayback Machine -laitteessa AFB-värjäykseen.