Axenic - Axenic
In biology , akseenista kuvaa tilan kulttuurin , jossa vain yksi laji, lajike, tai kanta organismi on läsnä ja täysin vapaa kaikista muista kontaminoivaa organismien. Varhaisimmat akseniset viljelmät olivat bakteereja tai yksisoluisia eukaryootteja , mutta myös monisoluisten organismien akseniset viljelmät ovat mahdollisia. Akseninen kulttuuri on tärkeä työkalu symbioottisten ja lois -organismien tutkimiseen valvotussa ympäristössä.
Valmistautuminen
Akseenista viljelmiä mikro-organismien valmistetaan tyypillisesti Alakulttuuri olemassa olevan sekaviljelmän. Tämä voi sisältää laimennussarjan käytön , jossa viljelmä laimennetaan peräkkäin siihen pisteeseen, että sen alinäytteet sisältävät vain muutamia yksittäisiä organismeja, mieluiten vain yhden yksilön (jos kyseessä on aseksuaalinen laji ). Näiden alakulttuurien annetaan kasvaa, kunnes niiden muodostavien organismien identiteetti voidaan varmistaa. Valinta niistä viljelmistä, jotka koostuvat yksinomaan halutusta organismista, tuottaa aksenisen viljelmän. Alakulttuurin valintaan voi kuulua myös näytteenotto kohdeorganismista käsin saastumattomalta kasvurintamalta muuten sekoitetussa viljelmässä ja tämän käyttäminen siirrännäislähteenä alakulttuurille.
Akseniset viljelmät tarkistetaan yleensä rutiininomaisesti sen varmistamiseksi, että ne pysyvät akseenisina. Yksi standardimenetelmä mikro -organismien kanssa on levittää näyte viljelmästä agarlevylle ja inkuboida tätä tietyn ajan. Agarin tulisi olla rikastettu väliaine, joka tukee tavallisten "saastuttavien" organismien kasvua. Tällaiset "saastuttavat" organismit kasvavat levylle tänä aikana ja tunnistavat viljelmät, jotka eivät ole enää astenisia.
Kokeellinen käyttö
Koska akseniset viljelmät ovat peräisin hyvin harvoista organismeista tai jopa yhdestä yksilöstä, ne ovat hyödyllisiä, koska niissä olevat organismit jakavat suhteellisen kapean geenipoolin . Jos kyseessä on yhdestä yksilöstä peräisin oleva aseksuaalinen laji, tuloksena olevan viljelmän tulisi koostua identtisistä organismeista (vaikka mutaatioiden ja horisontaalisen geenisiirron kaltaiset prosessit voivat aiheuttaa vaihtelua). Näin ollen ne vastaavat yleensä tasaisemmin ja toistettavammin , mikä yksinkertaistaa kokeiden tulkintaa .
Ongelmia
Joidenkin patogeenien akseninen viljely on monimutkaista, koska ne kukoistavat normaalisti isäntäkudoksissa, joilla on ominaisuuksia, joita on vaikea toistaa in vitro . Tämä pätee erityisesti solunsisäisten patogeenien tapauksessa . Kuitenkin, huolellinen replikaatio keskeisiä piirteitä isännän ympäristössä voi ratkaista nämä ongelmat (esim isäntä metaboliittien , liuennut happi ), kuten kanssa Q-kuume taudinaiheuttaja, Coxiella burnetii .