Kinyoun tahra - Kinyoun stain

Kinyoun menetelmä tai Kinyoun tahra (kylmä menetelmä), kehittänyt Joseph J. Kinyoun , on menetelmä, jota käytetään tahra haponkestävien lajien bakteerien suvuista Mycobacterium ja Nocardia ja Apicomplexan- suvun Cryptosporidium . Se on muunnelma Robert Kochin vuonna 1882 kehittämästä menetelmästä. Joidenkin bakteerilajien soluseinämissä on vahamainen lipidi nimeltä mykolihappo, minkä ansiosta ne voidaan värjätä Acid-Fastilla paremmin kuin Gram-Stain. Mykobakteerien ainutlaatuista kykyä vastustaa hapon alkoholin aiheuttamaa värinmuutosta, siksi niitä kutsutaan happokestäviksi. Se sisältää ensisijaisen värjäyksen ( emäksinen fuksiini ), värinpoistoaineen (happo-alkoholi) ja vastavärin ( metyleenisininen ). Toisin kuin Ziehl -Neelsen -tahra (ZN -tahra), Kinyoun -värjäysmenetelmä ei vaadi lämmitystä. Ziehl -Neelsen -tahrassa lämpö toimii fysikaalisena peittausaineena, kun taas fenoli (karbolifuskiinikarboli) toimii kemiallisena peittausaineena. Koska Kinyoun -tahra on kylmä menetelmä (ei lämpöä), käytetyn karbolifuskiinin pitoisuus kasvaa.

Yhteenveto haponkestävästä värjäyksestä (Kinyoun-tahra)
Soveltaminen Reagenssi Solun väri
Happo nopeasti Ei hapanta nopeasti
Ensisijainen väriaine Carbol fuchsin Punainen Punainen
Värinpoistoaine Hapan alkoholi Punainen Väritön
Laskuri tahra Metyleenisininen Punainen Sininen

Värjäysmenettely

Kinyoun -tahra organismissa Mycobacterium smegmatis

Tee haponkestävä tahra

Materiaalit

  • Liu'uta organismin tahralla
  • Carbol Fuchsin
  • Happo-alkoholi
  • Metyleenisininen
  • raamatullinen paperi
  • Mikroskooppi

Ohjeet

  1. Levitä objekti levylle organismeilla
    • Puhdista liukumäki, vahamerkki, levitä organismi, ilmakuivaa 10 minuuttia, lämpökiinnitys
  2. Kasta liuska Carbol Fuchsiniin 20 minuutiksi.
  3. Huuhtele luisti
  4. Kasta liuos happoalkoholiin 3-5 sekunniksi.
  5. Huuhtele dia
  6. Kasta liuku metyleenisiniseen 30 sekunniksi.
  7. Huuhtele dia
  8. Blotti kuivataan raamatullisella paperilla.
  9. Tarkkaile mikroskoopin alla.

Muutos

Kinyoun -menetelmää voidaan muuttaa heikon hapon nopeaksi tahraksi, jossa käytetään 5% rikkihappoa suolahapon sijasta. Heikko happoinen nopea tahra mykobakteerien värjäytymisen lisäksi värjää organismit, jotka eivät kykene ylläpitämään karboli -fuksiinia HCl: n värinpoiston jälkeen.

Katso myös

Viitteet

Tynkä -kuvake

Tämä mikrobiologiaan liittyvä artikkeli on tynkä . Voit auttaa Wikipediaa laajentamalla sitä .