Ziehl – ​​Neelsen -tahra - Ziehl–Neelsen stain

Mycobacterium tuberculosis -visualisointi käyttäen Ziehl -Neelsen -tahraa
Ziehl – ​​Neelsen (haponkestävä) tahra-kaavio perusvaiheista

Ziehl-Neelsen-värjäys on eräänlainen happokestävä tahra, jonka esitteli ensimmäisen kerran Paul Ehrlich . Ziehl-Neelsen-värjäys on bakteriologinen tahra, jota käytetään haponkestävien organismien, lähinnä mykobakteerien, tunnistamiseen . Se on nimetty kahden saksalaisen lääkärin mukaan, jotka muuttivat tahraa: bakteriologi Franz Ziehlin (1859–1926) ja patologin Friedrich Neelsenin (1854–1898).

Mykobakteerit

Anatomisissa patologianäytteissä immunohistokemia ja Ziehl-Neelsen-värjäyksen muutokset (kuten Fite-Faraco-menetelmä ) ovat vertailukelpoisia. Molemmat ovat parempia kuin perinteinen Ziehl -Neelsen -värjäys.

Suku Mycobacterium on hitaasti kasvava bakteeri, joka koostuu pienistä sauvoista, jotka ovat hieman kaarevia tai suoria ja joiden katsotaan olevan grampositiivisia. Jotkut mykobakteerityypit muodostavat oksia tai filamentteja. Jotkut mykobakteerit ovat vapaasti eläviä saprofyytejä, mutta monet ovat taudinaiheuttajia, jotka aiheuttavat sairauksia eläimillä ja ihmisillä. Mycobacterium bovis aiheuttaa tuberkuloosia naudoilla. Koska tuberkuloosi voi levitä ihmisiin, maito pastöroidaan tappamaan kaikki bakteerit. Joitakin Mycobacteria -lajeja, jotka aiheuttavat sairauksia ihmisillä, ovat Mycobacterium leprae , Mycobacterium kansasii , Mycobacterium marinum , Mycobacterium bovis , Mycobacterium africanum ja Mycobacterium avium -kompleksin jäsenet. Mycobacterium tuberculosis on Mycobacterium -laji, joka aiheuttaa tuberkuloosia (TB). Mycobacterium tuberculosis on ilmassa leviävä bakteeri, joka tyypillisesti tartuttaa ihmisen keuhkoja. Tuberkuloosin oireita ovat huono yskä, rintakipu, väsymys, laihtuminen, ruokahaluttomuus, vilunväristykset, kuume ja yöhikoilu. Tyypillinen hoito latentin tuberkuloosi -infektion hoitoon sisältää isoniatsidin, rifapentiinin ja rifampisiinin käytön. Hoito -ohjelmaa muutetaan niille, jotka ovat kehittäneet lääkkeille vastustuskykyisen tuberkuloosikannan. Tuberkuloosin testaus sisältää verikokeet, ihokokeet ja rintakehän röntgenkuvat. Kun tarkastellaan tuberkuloosin tahroja, se värjätään happokestävällä tahralla. Nämä happokestävät organismit, kuten Mycobacterium, sisältävät suuria määriä lipidiaineita soluseinissään, joita kutsutaan mykolihapoiksi. Nämä hapot kestävät värjäytymistä tavallisilla menetelmillä, kuten Gram -värjäyksellä . Sitä voidaan käyttää myös värjäämään muutamia muita bakteereja, kuten Nocardia . Ziehl -Neelsen -värjäyksessä käytetyt reagenssit ovat - karboli -fuksiini , happoalkoholi ja metyleenisininen . Haponkestävät basillit ovat kirkkaan punaisia ​​värjäyksen jälkeen.

Sienet

Ziehl -Neelsen -värjäys on eräänlainen kapeaspektrinen sienivärjäys. Kapean spektrin sienitahrat ovat valikoivia, ja ne voivat auttaa eriyttämään ja tunnistamaan sieniä. Ziehl -Neelsen -värjäyksen tulokset vaihtelevat, koska monet sienisoluseinät eivät ole happokestäviä. Esimerkki tavallisesta haponkestävästä sienestä, joka yleensä värjätään Ziehl-Neelsen-värjäyksellä, on nimeltään Histoplasma (HP). Histoplasmaa esiintyy maaperässä sekä lintujen ja lepakoiden ulosteessa. Ihminen voi saada histoplasmoosin hengittämällä sieni -itiöitä. Histoplasma tulee kehoon ja menee keuhkoihin, missä itiöt muuttuvat hiivaksi. Hiiva pääsee verenkiertoon ja vaikuttaa imusolmukkeisiin ja muihin kehon osiin. Yleensä ihmiset eivät sairastu itiöiden hengittämisestä, mutta jos he tekevät, heillä on yleensä flunssan kaltaisia ​​oireita. Toinen muunnelma tästä värjäyksen menetelmää käytetään mykologian differentiaalisesti värjätä haponkestävien kuortumat in kutikulaarisen rihmastoa tiettyjen lajien sieniä suvun Russula . Jotkut vapaat endosporit voidaan sekoittaa pieniin hiivoihin, joten värjäystä käytetään tuntemattomien sienien tunnistamiseen. Se on hyödyllinen myös joidenkin alkueläinten, nimittäin Cryptosporidiumin ja Isosporan , tunnistamisessa . Ziehl -Neelsen -tahra voi myös estää diagnosointia paragonimiasis -tapauksessa, koska tahra voi liuottaa munan ja loisen (O&P) ysköksenäytteessä olevat munat, ja sitä käytetään usein tässä kliinisessä ympäristössä, koska paragonimiasis -oireet muistuttavat läheisesti tuberkuloosista.

Historia

Vuonna 1882 Robert Koch löysi tuberkuloosin etiologian. Pian Kochin löytämisen jälkeen Paul Ehrlich kehitti mycobacterium tuberculosis -tahran, jota kutsuttiin alunan hematoksyliiniväriksi. Franz Ziehl muutti sitten Ehrlichin värjäystekniikkaa käyttämällä karbolihappoa peittausaineena. Friedrich Neelsen piti Ziehlin valinnan peittausaineena, mutta muutti ensisijaisen värjäyksen karboli -fuksiiniksi. Ziehlin ja Neelsenin muutokset yhdessä ovat kehittäneet Ziehl -Neelsen -tahran. Joseph Kinyoun kehitti toisen happokestävän tahran käyttämällä Ziehl-Neelsen-värjäystekniikkaa, mutta poistamalla kuumennusvaiheen menettelystä. Tämä uusi Kinyoun -tahra nimettiin Kinyoun -tahraksi.

Menettely

Tyypillinen AFB -värjäysmenettely sisältää solujen pudottamisen suspensioon objektilasille, sitten nesteen ilmakuivauksen ja solujen lämpökiinnityksen.

Yhteenveto haponkestävästä värjäyksestä (Ziehl – ​​Neelsen-tahra)
Soveltaminen Reagenssi Solun väri
Happo nopeasti Ei hapanta nopeasti
Ensisijainen väriaine Carbol fuchsin Punainen Punainen
Värinpoistoaine Hapan alkoholi Punainen Väritön
Laskuri tahra Metyleenisininen / malakiitinvihreä Punainen Sininen

Tutkimukset ovat osoittaneet, että AFB -värjäyksellä ilman viljelmää on huono negatiivinen ennustava arvo. AFB -viljely tulee suorittaa yhdessä AFB -värjäyksen kanssa; tällä on paljon suurempi negatiivinen ennustava arvo.

Happopitoisen värjäytymisen mekanismi happokestävissä soluissa ja ei-haponkestävissä soluissa.

Mekanismin selitys

Aluksi karbolifuksiini värjää jokaisen solun. Kun ne on värjätty happoalkoholilla, vain ei-happokestävät bakteerit värjäytyvät, koska niillä ei ole paksua, vahamaista lipidikerrosta, kuten haponkestäviä bakteereja. Kun käytetään vastavärjäystä, ei-happokestävät bakteerit ottavat sen talteen ja muuttuvat sinisiksi (metyleenisininen) tai vihreiksi (malakiittivihreä) mikroskoopilla katsottuna. Happokestävät bakteerit säilyttävät karboli-fuksiinia, joten ne näyttävät punaisilta.

Muutokset

Katso myös

Esimerkkejä online -protokollista

Viitteet

Bibliografia

  • "Mikrobiologia ja sairaudet kehon järjestelmän kautta", Robert W. Bauman, 2009, Pearson Education, Inc.

Ulkoiset linkit